培养条件：细胞培养的环境参数至关重要。气相组成应为95%空气与5%二氧化碳，温度设置在37℃，培养基选择MEM添加10% FBS及1% P/S，以保证细胞在最佳状态下生长。

传代方法：首次传代建议按1:2的比例进行。细胞培养应在每两天更换一次培养液，以确保营养供给充足。

注意事项：在收到细胞后，首先用75%酒精对细胞瓶进行喷洒消毒，然后在超净台内维持无菌环境，接着将细胞瓶放入37℃、5% CO2的培养箱静置3-4小时以稳定细胞状态。在此期间，利用显微镜观察细胞生长并拍照记录（建议使用40x、100x和200x的镜头拍摄），前三天的照片为售后依据，若未提交照片则默认细胞状态良好。

细胞处理程序：在细胞生长至良好状态后，灌满完全培养液并严密封闭瓶口是运输细胞的最佳方法。若在运输过程中发现细胞脱落，可将瓶内培养液收集至离心管后进行进一步处理。使用胰蛋白酶轻轻消化细胞，观察细胞状态，待细胞大部分变为球状后，加入完整培养基终止消化。接着，进行离心操作以去除上清液，最后重悬细胞并以指定比例分瓶。

细胞冻存方案：当细胞生长至培养瓶表面80%时，需进行冻存。使用PBS清洗后，加入胰蛋白酶消化，并在观察下确认细胞状态，最终将细胞与无血清冻存液混匀，装入冻存管中。冻存细胞应放置在-80℃冰箱中先行冷冻24小时，再转入液氮罐中以备用。

细胞复苏步骤：取出细胞冻存管后，迅速置于37℃的水浴中解冻，待管内无结晶后使用75%酒精消毒外壁。接着将迅速解冻的细胞移至含有培养基的离心管中，再进行离心并重悬。复苏后的细胞应接种于T25培养瓶中，在37℃、5% CO2的培养箱继续培养。

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